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全光譜流式細胞儀儀器優(yōu)缺點分析

更新時間:2024-03-07      點擊次數(shù):2776
  全光譜流式細胞儀是一種先進的流式細胞分析技術(shù),它相較于傳統(tǒng)流式細胞儀具有一些顯著的優(yōu)勢,但也存在一些局限性。
  以下是全光譜流式細胞儀的優(yōu)缺點:
  一、優(yōu)點:
  1.更多的檢測通道:光譜流式細胞儀可以提供多達38個或更多的熒光檢測通道,這遠遠超過了傳統(tǒng)流式細胞儀的通道數(shù)。
  2.光譜靈活性:由于能夠檢測400-900nm全范圍光譜,這種儀器可以檢測任何能被配置激光器激發(fā)的熒光染料,無需更換濾光片,提供了無限的靈活性。
  3.高光譜分辨率:光譜流式細胞儀能夠解析和補償調(diào)節(jié)分離高度重疊的熒光團,即使在光譜重疊度很高的兩種熒光染料也可以同時使用。
  4.擴展性強:可以通過增加激光器數(shù)量來進一步擴展檢測通道,例如,配備5根激光器可以實現(xiàn)64個熒光檢測通道。
  二、缺點:
  1.成本較高:由于其復(fù)雜的光學系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理需求,光譜流式細胞儀的成本通常高于傳統(tǒng)流式細胞儀。
  2.操作復(fù)雜:相比于傳統(tǒng)流式細胞儀,光譜流式細胞儀的操作和維護可能更為復(fù)雜,需要專業(yè)的技術(shù)人員進行操作和管理。
  3.數(shù)據(jù)分析難度:由于數(shù)據(jù)量的大幅增加,流式細胞儀產(chǎn)生的數(shù)據(jù)分析和解釋可能需要更高級的計算工具和專業(yè)知識。
  全光譜流式細胞儀與傳統(tǒng)流式之間的區(qū)別:
  傳統(tǒng)流式和光譜流式之間的第一個重要區(qū)別是色散。傳統(tǒng)流式是根據(jù)波長來阻擋、反射或傳輸光子的,而光譜流式是根據(jù)波長來色散光子的。最常見的色散光學元件是棱鏡和光柵。棱鏡是一種典型的色散光學元件,它根據(jù)波長的不同來折射光線。棱鏡的通量通常很高(>90%),色散發(fā)生在寬波長范圍內(nèi),但色散是非線性的,光譜分辨率隨著波長的變化而變化,通常在可見光譜中變化幾納米。光柵在特定波長下具有更高分辨率的線性色散,但高階衍射的存在會降低效率和通量,增加雜散光。體積相位全息光柵,在他們的最佳波長,也可以提高效率和分辨率,而且雜散光的強度較低。除了色散問題,其他光學效應(yīng),如球面像差,也會影響性能。大多數(shù)商用攝譜儀的設(shè)計都是為了最小化這些問題,以提供最大的光學性能。
  傳統(tǒng)流式和光譜流式的第二個主要區(qū)別是檢測器。棱鏡或光柵產(chǎn)生的連續(xù)光譜的測量需要一個線性陣列的檢測器。檢測陣列的密度和間距,以及色散光學的性能,共同決定分辨率。近年來,檢測技術(shù)發(fā)展迅速,目前光流式的檢測器主要有CCD和多陽極PMT。
 

全光譜流式細胞儀

 

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